PIP2 水解刺激产电在非洲爪蟾卵母细胞中表达的Na – 碳酸氢盐协同转运蛋白NBCe1-B和-C变体外文翻译资料

 2021-10-24 02:10

英语原文共 19 页

PIP2 水解刺激产电在非洲爪蟾卵母细胞中表达的Na - 碳酸氢盐协同转运蛋白NBCe1-B和-C变体

关键点:

bull;Na - 碳酸氢盐协同转运蛋白NBCe1调节细胞和组织的pH值,以及离子在肾脏肠道和胰腺等器官中穿过细胞层的运动。

bull;我们以前表明,信号分子PIP2 刺激克隆的A变体NBCe1在一片生物膜上。

bull;在目前的研究中,我们描述了将PIP2 注射到表达的完整卵母细胞中的作用NBCe1变体(A,B或C)。

bull;PIP2 通过水解成IP3刺激B和C变体,但不刺激A变体。刺激需要细胞内Ca2 储存和激酶活性。

bull;结果将有助于我们理解多种HCO3minus;依赖性转运蛋白具有不同的调节模式,以及刺激特定膜受体的分子如何导致细胞/组织pH的变化,以及可能导致能量缺乏的中风和局部缺血等病理导致组织酸中毒。

摘要:

电生成Na - 碳酸氢盐协同转运蛋白NBCe1变体有助于pHi 调节,促进许多上皮细胞对离子的重吸收或分泌。大多数Na - 偶联碳酸氢根转运蛋白(NCBT)家族,如NBCe1含有主要在胞质N和(或)C末端具有差异的变体,其可能赋予转运蛋白不同的调节模式。例如,NBCe1的N末端区域自动调节活性。我们小组先前报道细胞溶质磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(PIP2)刺激从非洲爪蟾卵母细胞切除的内向外巨噬细胞中异源表达的大鼠NBCe1-A。在目前对整个卵母细胞的研究中,我们使用双电极电压钳技术,以及pH和电压敏感的微电极,来表征注射PIP2 对异源表达的NBCe1-A,-B,-C活性的影响。将PIP2 (10mu;M估计最终)注射到电压钳制的卵母细胞中,对B和C变体刺激NBC介导的HCO3minus;诱导的向外电流gt; 100%,但不是A变体。这种刺激的大部分涉及PIP2 水解和内质网(ER)Ca2 释放。通过注射IP3模拟PIP2 注射的刺激,但是抑制通过应用磷脂酶C(PLC)抑制剂U73112或消耗ER Ca2 延长的毒胡萝卜素/ EGTA治疗。刺激存储操作的Ca2 通道(SOCC)的活性引发Ca2 流入,模仿B和C变体的PIP2/ IP3 刺激。用溶血磷脂酸(LPA)激活卵母细胞中的内源性Gq 蛋白偶联受体也以Ca2 依赖性方式刺激B和C变体,尽管通过B变体的表面表达增加。在同步电压钳和pHi 研究中在表达NBCe1-C的卵母细胞上,LPA增加了NBC介导的pHi - 从CO2 - 诱导酸负载80%。最后,一般激酶抑制剂staurosporine完全抑制IP3诱导的NBCe1-C刺激。总之,注射PIP2 通过涉及星形孢菌素敏感性激IP3/ Ca2 的增加来刺激卵母细胞中表达的NBCe1-B和-C的活性。结合我们以前的宏观发现,PIP2 通过双重途径调节NBCe1,包括PIP2 对至少NBCe1-A的直接刺激作用,以及IP3/ Ca2

关于B和C变体的间接刺激作用。

缩写:

AE,阴离子交换剂; BTR,碳酸氢盐转运蛋白相关蛋白; DAG,二酰基甘油; GPCR,G蛋白偶联受体; HA, 血凝素; IRBIT,与IP3一起释放的IP3受体结合蛋白; LPA,溶血磷脂酸; NBCe,电致Na - 碳酸氢盐协同转运蛋白; NBCn,电中性Na - 碳酸氢盐共转运蛋白; NCBT,Na - 偶联碳酸氢盐转运蛋白; NCBE,Na -驱动的Clminus; - 碳酸氢盐交换剂; NDCBE,Na 驱动的Clminus; - 碳酸氢盐交换剂; PIP2,磷脂酰肌醇4,5-二磷酸酯; PLC,磷脂酶C; PKA,磷酸激酶A; PKC,磷酸激酶C; Pretx,预处理; SOC,单卵母细胞化学发光; SOCC,储存钙通道; TG,thapsigargin。介绍:

Na - 偶联碳酸氢盐转运蛋白(NCBT)是pHi的强有力调节剂,并且还有助于上皮细胞中的跨上皮Na 和HCO3minus;重吸收和分泌。NCBTs包括Slc4基因家族中的以下旁系同源物(Romero等,2004):产电Na / HCO3minus;协同转运蛋白NBCe1(Slc4a4)和NBCe2(Slc4a5),电中性Na / HCO3minus; 共转运蛋白NBCn1(Slc4a7)和NBCn2 / NCBE(Slc4a10),和电中性 Na 驱动的 Clminus;-HCO3minus; 交换剂NDCBE(Slc4a8)。基因家族中的其他旁系同源物包括阴离子交换剂AE1-4(Slc4a1-3和-9)和较少表征的硼酸盐转运蛋白BTR1(Sl

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